最近在做实验RT-PCR,我做RT-PCR,一对引物Tm值分别是52.2,54.6.目的片段1062,PCR反应条件怎么设置呀

问题描述:

最近在做实验RT-PCR,
我做RT-PCR,一对引物Tm值分别是52.2,54.6.目的片段1062,PCR反应条件怎么设置呀

反转录PCR和普通PCR没区别,只要你的cDNA可以,53或54都行,用TAKARA的EXTAQ的话可以94度4min 之后94度30秒,53度30秒,72度1分钟,循环35-39吧,72度10分钟.其他的酶一般都有说明